脂质体制备技术

1. 脂质体的概念与特性

1.1 脂质体的定义

脂质体（Liposomes）是指将药物包封于类脂质双分子层内而形成的微小囊泡，由于结构上类似生物膜，故脂质体又被称为“人工生物膜”。脂质体的粒径大小可以从几十纳米到几十微米，双分子层的厚度约4nm。

1.2 脂质体的特性

脂质体具有以下主要特点：

• 靶向性：载药脂质体进入体内可以被巨噬细胞当作外界异物而吞噬，进而产生靶向性。
• 缓释性：脂质体包裹药物后可以减少肾脏排泄以及肝脏代谢从而延长药物在血液中的滞留时间。
• 降低药物毒性：药物被脂质体包封后，在肝、脾以及骨髓等网状内皮细胞较为丰富的器官中集中，从而降低药物的毒副反应。
• 增加细胞亲和性以及组织相容性：脂质体结构类似生物膜，对正常细胞和组织无损害和抑制作用。
• 保护被包封的药物：不稳定的药物被脂质体包封后受到脂质体双层膜的保护，可以提高稳定性。

2. 脂质体的组成和结构

脂质体由磷脂和胆固醇等组成，磷脂与胆固醇都是两亲性物质，其结构中含有亲水集团和疏水基团。用他们做脂质体的膜材时，常常先将二者溶于有机溶剂，然后蒸发除去有机溶剂，在器壁上形成均匀的薄膜，此膜是由磷脂和胆固醇混合分子相互间隔定向排列的双分子层组成。

3. 脂质体的分类

3.1 按脂质体的结构和粒径分类

• 单室脂质体：由一层类脂质双分子层构成者，称为单室脂质体。
• 多室脂质体：由多层类脂质双分子层构成的称为多室脂质体。

3.2 按脂质体性能分类

• 一般脂质体：包括上述单室脂质体和多室脂质体。
• 特殊性能脂质体：包括热敏脂质体、pH敏感脂质体、多糖被复脂质体、免疫脂质体等。

3.3 按脂质体荷电性分类

• 中性脂质体；
• 负电荷脂质体；
• 正电荷脂质体。

4. 脂质体的理化性质

4.1 相变温度

脂质体的物理性质与介质温度有密切关系。当温度升高时，脂质体双分子层中酰基侧键可以从有序排列变为无序排列，从而引起一系列变化。

4.2 电性

改变膜质体脂质材料种类，可以使脂质体表面电荷改变。如含磷脂酸和磷脂酰丝氨酸等的酸性脂质的脂质体荷负电，含碱基脂质如十八胺等的脂质体荷正电，不含离子的脂质体显电中性。

4.3 粒径和粒度分布

脂质体粒径大小和分布均匀程度与其包封率和稳定性有关，直接影响脂质体在机体组织的行为和处置。

5. 脂质体的作用机制

脂质体的结构与细胞膜相似，具有高度的组织相容性，能显著增加细胞的摄取。脂质体在体内与细胞的主要作用机制可以包括吸附、脂交换、内吞以及融合等。

6. 脂质体膜材料

6.1 磷脂

磷脂为两亲性物质，在其分子结构中含有一个磷酸基团和一个季铵盐的碱基均为亲水性基团，分子中还含有两个较长的烃链为亲油性基团。磷脂为脂质体的主要组成部分。

6.2 胆固醇

胆固醇是生物膜的重要附加剂，其也是两亲性分子，结构上亦有亲水和亲油两种基团。胆固醇本身不形成质双分子层结构，但它能以高浓度方式掺入磷脂膜中，调节脂质体的流动性、通透性、载药包封率。

7. 脂质体的制备方法

7.1 被动载药法

• 薄膜分散法：将磷脂和胆固醇等类脂及脂溶性膜材溶于有机溶剂，然后将溶液置于大的圆底烧瓶中，随后在减压旋转下除去溶剂，使脂质在器壁形成薄膜，加入含有水溶性药物的缓冲液，进行振摇，使脂质膜水化脱落，则可形成大多层脂质体。
• 溶剂注入法：注入法多采用乙醇注入法和乙醚注入法，此类方法是将类脂等脂质溶于有机溶剂中（油相），然后将油相匀速注入水相中（含水溶性药物），搅拌挥尽有机溶剂，再超声得到脂质体。
• French挤压法：将经过薄膜分散法形成的大脂质体放入French压力室，在很高的压力下挤压。French压力制备的脂质体包封物质保留时间比超声和表面活性剂去除法长。
• 冻融法：将预先制备好的脂质体悬浊液进行反复几次冷冻-融解操作获得脂质体溶液。
• 复乳法：指采用水相溶剂与有机溶剂进行第一次初乳化，形成 W/O 型反胶团，再加入大量水相溶剂，进行第二次乳化，形成 W/O/W 型复乳，减压蒸发除去有机溶剂，即得脂质体。
• 二次冻干法：将水溶性药物溶于含氨基酸结构的高分子亲水胶体，加入泊洛沙姆混匀后，形成 W/W 型胶体溶液，将其冻干后转入含有脂质材料的叔丁醇溶液中，超声处理后再次冷冻干燥即得脂质体。

7.2 主动载药法

• 逆相蒸发法：系将磷脂等膜材溶于有机溶剂，如氯仿、乙醚等，加入待包封药物的水溶液（水溶液：有机溶剂=1:3~1:6）进行短时超声，直至形成稳定的W/О型乳剂，减压蒸发有机溶剂，形成脂质体。